PSA是主要由前列腺上皮细胞产生的蛋白分解酶,正常情况下被分泌入前列腺液或精液中,以有活性的游离形式(f-PSA)存在,血清中的PSA主要以结合形式存在。那么,PSA酶免试剂盒怎么使用?
PSA酶免试剂盒用于定量检测人血清中PSA。使用方法有两种,其中一种方法如下:
1、20X洗涤液用水稀释成工作浓度后4℃保存备用;
2、在酶标板架中插入所需数量的抗体包被酶标板条,每个标准品及待检样品均需做两孔,建议再留出两孔做不加标准品及样品的空白对照,未使用的板条重新密封,干燥保存在2-8℃;
3、在适当位置加入20ul标准品或待测血清;
4、每孔加入80ul样品稀释液,混匀5s,充分混匀是此步的关键;
5、置湿盒中37℃反应60min;
6、甩去液体,用洗涤液注满酶标板各孔并保留20秒,甩去液体;
7、重复上述洗涤过程2次,快速将酶标板用力扣在吸水纸上以去除剩余水滴,如有气泡用吸球除去;
8 、每孔加入100ul(或2滴)酶标抗体;
9 、混匀5s,充分混匀是此步的关键;
10、置湿盒中37℃反应30min;
11、重复上述洗涤过程3次,快速将酶标板用力扣在吸水纸上以去除剩余水滴,如有气泡用吸球除去;
12、每孔顺序加入显色液A、B各一滴,轻柔混合5s;
13、置湿盒中,37℃避光反应15min;
14、每孔加入一滴终止液以终止反应;
15、轻柔混合10s以使蓝色显色液完全转变成黄色,注意避免气泡;
16、30min内用酶标仪在450nm处读板。
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