1. 基本原理:PCR技术基于DNA的复制机制。通过模拟生物体内的DNA复制过程,PCR技术能够在短时间内将特定的DNA片段大量复制。这一技术需要引物、模板、能量、酶和原料等要素。引物是与模板DNA特定序列互补的短DNA片段,它们识别并结合到模板上,引导DNA的合成。2. 操作过程:在PCR反应中,反应混合物中的引...
1. 操作和维护PCR仪器:PCR人员需要熟练操作各种PCR仪器,包括热循环仪、电泳仪等。他们还需要对仪器进行日常维护,确保仪器的正常运行。2. 进行DNA扩增:PCR的核心是DNA的扩增,PCR人员需要按照规定的程序和方法,将DNA样本进行扩增,以获得足够的数量用于后续分析。3. 样本处理与检测:PCR人员需要对采集...
4. 应用:由于其高效性和特异性,PCR技术被广泛应用于遗传病诊断、基因克隆、DNA测序、法医鉴定、疾病检测(如新冠病毒的RT-PCR检测)以及生物研究的多个方面。PCR技术的发展还包括了实时定量PCR(qPCR)、数字PCR(dPCR)等高级形式,这些技术进一步提高了DNA检测的敏感性和准确性。
参加PCR反应的物质主要有五种即:引物、酶、dNTP、模板和缓冲液。1、引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的...
【答案】A 【答案解析】试题分析:①目的基因提供模板;②一对引物;③四种脱氧核苷酸作为原料;④热稳定DNA聚合酶从引物开始互补链的合成;答案选A。考点:PCR技术的条件。点评:基础知识考查,基本概念的识记。
PCR技术的主要步骤如下:1、dna变性:(90℃-96℃):在热作用下,双链dna模板的氢键断裂,行程单链dna。2、退火:(60℃-65℃):体系温度降低,引物与dna模板结合形成局部双链。3、延伸:(70℃-75℃:以dntp为原料,在taq酶的作用下(72℃左右),以dntp为底物,从引物的3′端开始,从5′→...
PCR的技术的主要步骤及PCR引物设计的一般原则分述如下:PCR的技术的主要步骤:1、DNA变性:(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。2、退火:(60℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3、延伸:(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的...
PCR技术全称为聚合酶链式反应,它主要通过DNA的半保留复制过程实现基因片段的放大。具体来说,PCR技术包含以下主要步骤和原理:1. 模板DNA的变性。在PCR过程中,首先需要将模板DNA在高温下解旋,使双链DNA变成单链,以便进行后续的引物配对和延伸反应。2. 引物的配对。当模板DNA解旋后,合成的引物会与模板...
PCR即聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction)的缩写,它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物,在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行,在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物...
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增...